1.定性檢測體外檢測試劑

1.1檢出限

一般(ban)采(cai)用檢出(chu)限（Limit of Detection, LoD）指(zhi)標來體現(xian)注冊申報產品的檢出(chu)能力(li)。檢出(chu)限的研究，應采(cai)用多(duo)批試劑，多(duo)個樣本進行，且研究應持續多(duo)天。

可給出連(lian)續量(liang)值信號的定(ding)(ding)性(xing)檢(jian)(jian)測(ce)試劑(ji)(ji)，如基于酶聯免疫吸附技(ji)術(shu)的檢(jian)(jian)測(ce)試劑(ji)(ji)采用吸光度響應區別“有(you)反(fan)應”和“無反(fan)應”結果(guo)。對于此類檢(jian)(jian)測(ce)，可參考《定(ding)(ding)量(liang)檢(jian)(jian)測(ce)試劑(ji)(ji)分析(xi)性(xing)能評估注冊技(ji)術(shu)審查指導原則》中相(xiang)關內容，設定(ding)(ding)空(kong)白限和LoD。注意：這不適用于臨界值遠高于檢(jian)(jian)出限的檢(jian)(jian)出項目。

1.2LOD的建立

建議(yi)采用對已知分(fen)析物濃(nong)度的(de)(de)(de)樣本進行系(xi)列(lie)稀釋后重(zhong)復檢(jian)測(ce)的(de)(de)(de)方法(fa)，確定申(shen)報試(shi)劑的(de)(de)(de)檢(jian)出(chu)限。在(zai)上述重(zhong)復檢(jian)測(ce)過程中(zhong)，記錄不同稀釋度/濃(nong)度檢(jian)出(chu)（或陽性）的(de)(de)(de)結果。采用適(shi)當的(de)(de)(de)模型（如Probit分(fen)析）和(he)分(fen)析方法(fa)，計算申(shen)報試(shi)劑在(zai)設定概率下的(de)(de)(de)檢(jian)出(chu)限，一般在(zai)該檢(jian)測(ce)濃(nong)度下應(ying)具有95%的(de)(de)(de)陽性檢(jian)出(chu)率。

染(ran)色(se)體檢測試劑，需要考(kao)慮不同(tong)嵌(qian)合(he)比(bi)例的檢出(chu)情況（如適用）。

線粒體(ti)突(tu)變(bian)檢測(ce)試劑和腫瘤基因突(tu)變(bian)檢測(ce)試劑，應(ying)考慮特定核酸濃度(du)下，不(bu)同突(tu)變(bian)比例檢出情況下的LOD（如適用）。

病(bing)原體檢(jian)測試劑(ji)，應(ying)納入代表性型別(bie)，分(fen)別(bie)計算每個型別(bie)的LoD，并取最大值作(zuo)為整個檢(jian)測試劑(ji)的LOD，或(huo)分(fen)別(bie)聲(sheng)稱(cheng)不同(tong)型別(bie)的LOD。對于罕(han)見(jian)的型別(bie)，可在后續(xu)的檢(jian)出限驗證試驗中進行確認(ren)。

人(ren)類(lei)基(ji)因突變（胚系突變）或(huo)基(ji)因多態性檢測試劑，應包含(han)對型別為雜合子的樣本進行LOD（核酸濃度）研究。

1.2LOD的驗證

注冊(ce)申報產品(pin)應在檢測限(xian)濃(nong)度(du)(du)水(shui)平對(dui)常見(jian)分析物(wu)型別(bie)進(jin)行(xing)(xing)驗(yan)證，一般采用對(dui)檢出限(xian)濃(nong)度(du)(du)水(shui)平樣本進(jin)行(xing)(xing)至少20次的(de)重復試驗(yan)的(de)方(fang)(fang)法(fa)(fa)對(dui)LOD進(jin)行(xing)(xing)驗(yan)證。申請人應明確(que)檢出限(xian)驗(yan)證中，各個(ge)樣本的(de)來源、型別(bie)及濃(nong)度(du)(du)確(que)認的(de)方(fang)(fang)法(fa)(fa)信息。

2.定量檢測體外檢測試劑

2.1空白(bai)限(xian)、檢出限(xian)及定量限

定量檢(jian)測體外診斷試(shi)劑對樣(yang)本濃(nong)度下限(xian)(xian)的(de)(de)檢(jian)出(chu)能(neng)力指標包括(kuo)空白限(xian)(xian)（LoB）、檢(jian)出(chu)限(xian)(xian)（LoD）及定量限(xian)(xian)（LoQ）。申請(qing)人(ren)應根據產(chan)品的(de)(de)具(ju)體情(qing)況選(xuan)擇適(shi)用的(de)(de)方法進行檢(jian)出(chu)能(neng)力的(de)(de)研究，如(ru)產(chan)品不適(shi)用于(yu)LoB、LoD和LoQ的(de)(de)概念(nian)，應提供充分說明。

2.2空白限、檢出限及定量限的建立

LoB，LoD，LoQ的建立需分別選(xuan)擇(ze)多個獨立的樣本（空(kong)白樣本、低(di)濃度水平樣本、已知(zhi)濃度的低(di)水平樣本），在多天(tian)內進(jin)行研究。

LoB一(yi)般(ban)由(you)多個(ge)獨立的(de)空白樣(yang)(yang)本（無分(fen)析物(wu)）的(de)檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)(jie)果(guo)(guo)計(ji)算(suan)獲得(de)(de)；LoD一(yi)般(ban)由(you)多個(ge)獨立的(de)低濃度（含有分(fen)析物(wu)）樣(yang)(yang)本的(de)檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)(jie)果(guo)(guo)，結(jie)(jie)合LoB進行(xing)計(ji)算(suan)獲得(de)(de)。應根據具(ju)體產品的(de)原理(li)、檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)(jie)果(guo)(guo)差異(yi)和數(shu)據分(fen)布，選擇(ze)合理(li)的(de)試(shi)驗(yan)方案和統計(ji)分(fen)析方法。對(dui)(dui)于空白樣(yang)(yang)本檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)(jie)果(guo)(guo)為(wei)(wei)陰性(xing)或零(ling)，LoD濃度樣(yang)(yang)本在(zai)預設(she)概(gai)率下（例如(ru)95%）檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)(jie)果(guo)(guo)為(wei)(wei)陽性(xing)的(de)試(shi)劑(ji)，可(ke)采(cai)(cai)用(yong)對(dui)(dui)多個(ge)已知分(fen)析物(wu)濃度的(de)樣(yang)(yang)本進行(xing)系列稀釋后(hou)重復檢(jian)(jian)測(ce)獲得(de)(de)LoD，例如(ru)病原體核酸檢(jian)(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)，采(cai)(cai)用(yong)95%陽性(xing)檢(jian)(jian)出率作(zuo)為(wei)(wei)其LoD。對(dui)(dui)于分(fen)析物(wu)包(bao)括不同型(xing)(xing)別(bie)的(de)檢(jian)(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)，應納入(ru)所(suo)有代表型(xing)(xing)別(bie)的(de)樣(yang)(yang)本，分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)各型(xing)(xing)別(bie)的(de)LoD，取最大(da)值作(zuo)為(wei)(wei)申報試(shi)劑(ji)的(de)LoD。罕見型(xing)(xing)別(bie)可(ke)在(zai)LoD建(jian)立過程(cheng)中評估，亦可(ke)在(zai)驗(yan)證過程(cheng)中進行(xing)確認。

LoQ應滿(man)足(zu)預設準確度(du)指標，即考慮(lv)偏倚和精密度(du)的要求。偏倚可通過檢測(ce)具有可接受參考量值的樣(yang)(yang)本進行評估，所以需獲得已知濃(nong)度(du)的低水平(ping)樣(yang)(yang)本，例如本文(wen)（二(er)）1.1中(zhong)所述參考物質。如涉及將樣(yang)(yang)本稀釋至低濃(nong)度(du)水平(ping)，應(ying)確保稀釋液不(bu)引(yin)起明顯(xian)的基質效應，且在(zai)低濃(nong)度(du)區(qu)間(jian)呈線性。精(jing)(jing)密度(du)的評估(gu)可(ke)根(gen)據(ju)檢測試劑(ji)及其應用確(que)定其測量條件(jian)，一般應至少包括重復(fu)性和(he)日(ri)間(jian)精(jing)(jing)密度(du)。在(zai)某些情況下，如無法(fa)在(zai)合適的低水(shui)平(ping)分析物(wu)濃(nong)度(du)下確(que)定偏倚(yi)，可(ke)采用其他合理的替(ti)代(dai)方法(fa)評估(gu)LoQ，例(li)如研究試劑(ji)精(jing)(jing)密度(du)達到(dao)特定要求時的最低分析物(wu)濃(nong)度(du)。建議僅在(zai)無法(fa)確(que)定偏倚(yi)時采用替(ti)代(dai)方法(fa)，并且應設置較為嚴格的精(jing)(jing)密度(du)要求。

2.3空白限、檢出限及定量限的驗證

LoB，LoD，LoQ的驗證(zheng)需各選擇至少(shao)2個(ge)(ge)樣本(ben)(ben)（空白樣本(ben)(ben)、檢(jian)出限濃(nong)度樣本(ben)(ben)、定量限濃(nong)度樣本(ben)(ben)），在多天內(nei)進(jin)行試(shi)驗。每個(ge)(ge)試(shi)劑(ji)批次至少(shao)需要獲得(de)20個(ge)(ge)檢(jian)測(ce)結果，計算符合要求的檢(jian)測(ce)結果比例，如果比例符合統計學要求/預設的臨(lin)界值，則4.1建立的LoB，LoD，LoQ得(de)到驗證(zheng)。一(yi)般來講，LoB總是低(di)于(yu)LoD，而(er)LoD則低(di)于(yu)或等(deng)于(yu)LoQ。